Cómo hacer Agar Papa Dextrosa
agar patata dextrosa (PDA) es un buen medio semisólido de propósito general que se utiliza para el cultivo de hongos. A menudo se utiliza para aislar, cultivar y mantener las especies que forman de hongo. placas de Petri o tubos de ensayo que contienen PDA ya hecha se pueden comprar, o PDA puede ser rápidamente hizo uso de una premezcla comercial. Sin embargo, no es difícil de hacer una versión simple y eficaz desde cero a un bajo costo.
Contenido
Cosas que necesitará
- 300 g de pelado, patatas troceadas
- Cacerola
- colador de cocina o una gasa
- papel de prueba de pH o medidor de pH
- Ácido clorhídrico 1 molar
- Hidróxido de sodio 1 molar
- 4 matraces de 500 mL glass Ehrlenmayer (u otros recipientes esterilizables en autoclave de boca estrecha)
- dextrosa (glucosa) en polvo 10 g
- 20 g de agar
- Papel de aluminio
- Olla a presión
- placas de Petri estériles
Preparación de extracto de patata
Colocar las patatas en una cacerola con aproximadamente 1,2 litros de agua del grifo y hervir en una estufa durante 1 hora.
Video: CULTIVO DE HONGOS: TÉCNICA DEL AGAR.
Retire la olla del calor y dejar enfriar el líquido hasta que pueda ser cómodamente manipulado (aproximadamente 10 minutos).
Verter extracto de patata líquido a través de un colador o una gasa y recogerla en otro recipiente.
Preparación del Medio
Añadir dextrosa y agar a 1 litro del agua de extracto de patata.
Pruebe el pH de la solución con papel de prueba de pH o un medidor de pH.
Si el pH está por encima de 6,5, ajustar hacia abajo mediante la adición de una gota de la solución de ácido clorhídrico a la vez y volver a probar.
Si el pH es inferior a 6, ajustar mediante la adición de una gota de la solución de hidróxido de sodio a la vez y volver a probar.
Esterilización
Mezclar bien el medio y se divide en lotes más pequeños de 250 ml vertió en los cuatro matraces de 500 ml (Nota: cada matraz debe ser no más de medio completo para evitar ebullición a).
Video: Cómo hacer un medio de cultivo casero
Cubra cada matraz con un trozo de papel de aluminio sin apretar engarzado, por lo que la lámina no se caiga, pero no hacer un sello hermético.
Colocar los frascos en una olla a presión.
Operar la olla a presión de acuerdo con las instrucciones del fabricante para esterilizar el PDA a 121 grados C (250 grados F) a una presión de 103,421 pascales (15 psi) durante 15 minutos.
Cierre la olla a presión y se deja volver a la presión atmosférica, a continuación, quitar los matraces y dejar que se enfríe hasta que puedan ser manejados.
Verter el Medio
Alinear las placas de Petri estériles sobre una superficie plana.
Video: PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO
Una vez que los frascos se han enfriado a temperatura de manipulación, pero antes de que el medio comienza a solidificarse, sujete un frasco con una mano y retirar y reservar su tapa de lámina con la otra mano.
Para cada placa de Petri, levantar la tapa con una mano, rápidamente llenar hasta la mitad con PDA líquido, y vuelva a colocar la tapa.
Repita el Paso 3 anterior hasta que todos petri en forma de plato están llenos.
Si hay cualquier PDA que queda, sin apretar recuperar el frasco con su tapa de aluminio original, dejar enfriar y solidificar, apretar la tapa de lámina y guarde en el refrigerador.
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