Introducción a cultivos de tejidos vegetales

Las plantas tienen una potencia regenerativa notable, como lo demuestra la relativa facilidad con la que pueden tener sus raíces, trasplantan e injertados. Los primeros intentos de cultivo de plantas in vitro a partir partes aisladas no tuvieron éxito, porque el conocimiento de la nutrición y fisiología vegetal era inadecuada. Con el descubrimiento de las hormonas esenciales para las plantas, se hicieron algunos progresos a partir de los años 1920 y 30.
Un avance importante fue hecha por Philip R. White en 1939 con su informe de cultivo continuo de la zanahoria y el tabaco hecho completamente in vitro. Se ha seguido avanzando por Folke Skoog, quien descubrió nuevas e importantes propiedades de la hormona auxina. Skoog, junto con Toshio Murashige, pasó a desarrollar la solución nutriente de plantas estándar todavía ampliamente utilizado --- Murashige-Skoog (MS).
El trabajo iniciado por Kenneth Vivian Thimann a finales de 1950, lo que demuestra que kinetina rompió el letargo de las yemas laterales, lo que les permite desarrollarse como si estuvieran en las puntas de las plantas, abrió el camino para avances rápidos. A partir de entonces, nuevos e importantes resultados se dieron a conocer casi todos los años. Hoy en día casi cualquier planta se puede cultivar bajo control laboratorio a partir de una amplia gama de tejidos de partida.

Los principales métodos de cultivo de tejidos se clasifican según el material de partida. Algunas especies se pueden iniciar fácilmente de un pedazo de hoja de corte. Muchos se pueden cultivar a partir de semillas in vitro, lo que permite la generación de plantas que pueden de otro modo serían difíciles de criar. El cultivo de embriones es similar a las semillas de cultivo, excepto los embriones se extraen de las semillas antes de comenzar.
cultivo de meristemas comienza con puntas de las raíces o ramas cortadas. Meristemas son las zonas en crecimiento activo en los vértices de las raíces, brotes y yemas laterales.

Video: Cultivo in vitro de tejidos vegetales

Video: Laboratorio de cultivo de tejidos

En la Etapa I, se selecciona un material de partida (el propágulo) y se preparó para la cultura. El primer paso es para desinfectar el material por remojo durante un corto tiempo en una solución de antibiótico, lejía o alcohol. El explante se enjuaga y se coloca en un tubo de ensayo o placa de Petri que contiene medio de cultivo esterilizado. El medio de cultivo es generalmente una variación de medio MS que contiene todos los elementos esenciales, vitaminas y hormonas para estimular el tipo deseado de crecimiento. El medio se hizo semisólido mediante la adición de agar.

El objetivo de la Etapa II micropropagación es la proliferación de brotes mediante el uso de un alto citoquinina: relación auxina. El potente hormona 2,4D se utiliza aquí, si se desea tejido de callo. Para promover la multiplicación de brotes, altas concentraciones de cinetina, bencilaminopurina (BA) o N6- (2-isopentenil) adenina (2iP) se utilizan junto con una forma inestable o baja concentración de auxina. Esta combinación promueve axilares o adventive formación de brotes, mientras que la inhibición de crecimiento de las raíces.
Una característica clave de la Etapa II es la facilidad con la que muchos más culturas se pueden derivar de ella. La proliferación de brotes se transfieren fácilmente a otra etapa II condiciones para generar rápidamente muchos más brotes. Esto se puede continuar indefinidamente hasta que se produce la contaminación o las plantas aparecen deforma.

Durante la etapa III, el objetivo es formar plantas completas con sistemas de raíces y brotes viables. Esto se hace mediante la reducción de kinetins y el suministro de suficiente auxina. Las auxinas se añaden directamente al medio, o las bases de brotes se pueden sumergir en una solución de auxina durante el trasplante a los nuevos medios.
Un procedimiento de endurecimiento se requiere a menudo para aumentar la capacidad de supervivencia de la Etapa III plantas antes del encapsulamiento. Esto se hace aumentando gradualmente la luz, reduciendo la humedad y permitiendo que las plantas experimentan aumento de las variaciones de temperatura. Una vez endurecido, la transferencia al suelo u otro medio de crecimiento es el mismo que para cualquier otra planta, pero se necesita más atención ya que las plantas tienden a ser ligeramente menos resistente en comparación con los individuos cultivadas tradicionalmente.